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重组结核分枝杆菌蛋白

RECOMBINANT M. tuberculosis PROTEINS




突破限制  开启新时代

       结核分枝杆菌蛋白是结核病基础研究、临床研究、疫苗药物研发的有力工具。然而,相对于一般重组蛋白,结核分枝杆菌蛋白的表达纯化存在诸多难题:结核分枝杆菌的培养需要P3实验室,模板难以获得;结核分枝杆菌基因的GC 含量在60%以上,给基因克隆造成了困难;重组结核分枝杆菌蛋白表达时通常形成包涵体,极难以可溶形式表达……这些困难使得研究人员难以获得高质量的结核分枝杆菌重组蛋白。
       体必康集团根据在结核分枝杆菌领域的十多年研究经验,成功构建了包含4342个基因的结核分枝杆菌基因库,并将4262 个结核分枝杆菌蛋白进行了表达纯化。体必康结核分枝杆菌重组蛋白通量高、纯度高、浓度高、性价比高、内毒素低,在同类产品中具有显著优势,为广大结核分枝杆菌科研工作者提供了高质量的研究工具。

背景介绍

             BACKGROUND INFORMATION

结核分枝杆菌基因产品库


       结核分枝杆菌标准菌株H37Rv的全基因组由4411532 bp组成,包括4111个 基因,其中蛋白质表达基因4018个,约占整个基因组容量的 91%。基因组GC含量相对稳定,高达65。6%。我们将结核分枝杆菌H37Rv 菌株3914个基因和CDC1551 菌株428个基因分别插入克隆载体 pDONR221上,构建了全基因组覆盖率为98%的结核分枝杆菌基因产品库。   

产品特点

CHARACTERISTICS 

◆  包含 4342 个重组质粒,全基因组覆盖率高达98%
◆  均为质粒产品,浓度高、纯度高
◆  具有 attL 克隆位点,便于高通量更换载体
◆  提供多种表达载体,可进行表达载体筛选 

产品应用

APPLICATIONS

◆  相关基因分子克隆模板
◆  重组蛋白表达载体    

大肠杆菌表达系统表达纯化的重组结核分枝杆菌蛋白产品库


       通过Gateway技术将结核分枝杆菌整个基因库高通量克隆到常见表达载体,随后转化BL21(DE3)大肠杆菌表达菌株后进行大量表达,最后通过包涵体变复性或可溶表达纯化的方法获得了包含4181个重组结核分枝杆菌蛋白的蛋白产品库。    

产品特点

CHARACTERISTICS

SDS-PAGE电泳检测纯化重组结核分枝杆菌蛋白Rv0351的结果示例:

◆  含有 6×His 融合标签,便于检测                                                   

◆  内毒素水平低于 10 EU/μg

◆  蛋白纯度高于 85%                                                                        

◆  蛋白纯度、浓度和内毒素水平可根据客户需求进行订制           

◆  蛋白浓度高于 300 ng/μl                                                                                      
   

产品应用

APPLICATIONS

◆  抗体制备                                                                  

◆  抗原-抗体检测实验       

◆  新型诊断标志物的筛选                                                

 ◆  疫苗研发

注:M表示蛋白Marker,x3表示蛋白稀释3倍,x2表示蛋白稀释2倍,x1表示蛋白未稀释

酿酒酵母表达系统表达纯化的重组结核分枝杆菌蛋白产品库


       通过Gateway技术将结核杆菌整个基因库高通量克隆到酿酒酵母穿梭质粒上,经过大肠杆菌扩增后再转化酿酒酵母,进行体外高通量可溶表达和纯化,最终获得了包含4000多个重组结核分枝杆菌蛋白的蛋白产品库。 

产品特点

CHARACTERISTICS 

银染和western blotting两种方法检测纯化重组结核分枝杆菌蛋白Rv1794的结果示例:

◆   蛋白数量大,覆盖率高 

◆   目的蛋白含GST融合标签,全部为可溶表达               

◆   银染方法检测验证目的蛋白纯度高,无明显杂带 

◆   高通量表达,单个蛋白量较小      

◆   内毒素水平低    

   
Rv1794

产品应用

APPLICATIONS

◆  抗体制备      

◆  抗原-抗体检测实验       

◆  新型诊断标志物的筛选                          

 ◆  疫苗研发

anti-GST抗体
注:E1,E2和E3分别表示洗脱过程中的三个不同洗脱收集管的蛋白水平